降鈣素ELISA試劑盒測定樣品中人降鈣素原水平

　　降鈣素ELISA試劑盒是一種由32個氨基酸組成的線性多肽激素，在人體內，主要由甲狀腺的濾泡旁細胞(也稱為C細胞)產生，在其他動物中，由末咽體產生，它的作用是降低血鈣(Ca2+)，抵抗甲狀旁腺激素(PTH)，在魚類、爬行動物、鳥類和哺乳動物中發現了降鈣素。

　　降鈣素是通過蛋白水解切割較大的前多肽原形成，該前多肽原是基因的產物，在功能上它是PTH和維生素D3的拮抗劑，高濃度的降鈣素可能通過對腎小管的作用增加尿鈣和磷酸鹽的排泄，進而導致明顯的低鈣血症。在骨骼的保護中，降鈣素避免鈣動員過程中(如懷孕，尤其是哺乳期)骨骼鈣流失，此外，降鈣素抑製大鼠和猴子的攝食，可能具有調節攝食和食欲中樞神經係統的作用。

　　每孔加入250μl檢測緩衝液，室溫孵育2小時，或者2 - 8°C封閉過夜，封閉後的酶標板可置於2-8°C貯存1個星期，或者-20°C貯存2個月，封閉後的酶標板若要立即使用，請先洗滌兩次，然後加入樣本。撕掉封板膜、棄掉孔中液體，每孔加入約300μ的洗液，洗滌6次，每次洗完都要徹底移除孔中溶液，條件允許的話，加入洗液後300轉/分鍾振蕩60秒，注意請勿接觸酶標板的表麵。每次洗滌，在吸水紙上拍幹多餘的洗液，洗板完成後請立即使用酶標板，或者顛倒置於濕的吸水紙上不得超過15分鍾，不要讓酶標板幹燥。

　　降鈣素ELISA試劑盒采用雙抗體夾心法酶聯免疫吸附檢測技術，測定樣品中人降鈣素原水平，向預先包被了抗人降鈣素原抗體的酶標孔中，加入標準品和樣本，溫育後，加入生物素標記的抗降鈣素原抗體，再與HRP標記的鏈黴親和素結合，形成免疫複合物，再經過溫育和洗滌，去除未結合的酶，然後加入顯色底物TMB，產生藍色，並在酸的作用下轉化成黃色，在450 nm處測定反應孔樣品吸光度值，樣本中的人降鈣素原濃度與OD值成正比，通過繪製標準曲線計算出樣本中人降鈣素原的濃度。