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鴨環磷酸鳥苷(cGMP)ELISA試劑盒樣本處理及要求

鴨環磷酸鳥苷(cGMP)ELISA試劑盒樣本處理及要求:
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鍾,離心20分鍾左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現沉澱,應再次離心。
2. 血漿:應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鍾後,離心20分鍾左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉澱形成,應該再次離心。
3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鍾左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉澱形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4. 細胞培養上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鍾左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反複凍融,以使細胞破壞並放出細胞內成份。離心20分鍾左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉澱形成,應再次離心。
5. 組織標本:切割標本後,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化後仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鍾左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝後一份待檢測,其餘冷凍備用。
6. 標本采集後盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取後應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放於-20℃保存,但應避免反複凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑製辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

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